毒死蜱对斑马鱼早期生活阶段毒性效应评价,该文是关于阶段类毕业论文格式范文和斑马鱼和毒死蜱和毒性有关论文范本.
阶段论文参考文献：
摘 要为评价毒死蜱对鱼类早期生活阶段毒性效应,以斑马鱼（Brachydanio rerio）为测试生物,测定其对斑马鱼胚胎34d的发育毒性.结果表明,与空白对照组相比,毒死蜱0.0080mg/L、0.0160mg/L处理对斑马鱼体长、干重产生显著抑制作用.
关键词毒死蜱；斑马鱼；早期生活阶段；毒性
中图分类号：R512.6
文献标识码：C
文章编号：2095-1205(2018)04-30-02
毒死蜱（chlorpyrifos）,别名乐斯本,化学名称：o,o-等于乙基-0-0(3,5,6_三氯一2_吡啶基)硫代磷酸酯,其具有广谱杀虫活性,通过触杀、胃毒和熏蒸方式均有效,无内吸作用.适用于水稻、小麦、棉花、果树、蔬菜、茶树上多种咀嚼式和刺吸口器害虫,也可用于防止城市卫生害虫,在推荐剂量下,对多数作物没有药害【1】.
截止2018年国内经农业部批准且仍在有效期内的毒死蜱单剂及复配产品超过1100个,使用范围广且使用量大,是我国杀虫剂市场的重要产品【2】.目前对毒死蜱引起生态毒性效应报道主要为急性毒性,而其对鱼类慢性毒性影响的研究鲜有报道.
1 材料与方法
1.1药剂与仪器
毒死蜱原药由广东中科英海科技有限公司提供,纯度为98%,超声助溶配制成一定浓度的贮备液,然后用试验用水稀释成所需浓度；采用莱卡倒置生物显微镜(型号：DMi8)进行观察；利用waters高效液相色谱仪(型号：Acquity-Arc)进行试验溶液中毒死蜱的浓度测定.
1.2试验生物
斑马鱼（Brachydanio rerio）种鱼引种于国家斑马鱼资源中心,于本实验室长期驯养,试验所用胚胎为其繁殖所得.通过显微镜观察,选取受精2h内发育正常的健康胚胎用于试验.
1.3试验方法
1.3.1药剂浓度分析
分别在试验暴露开始时和更换试验溶液前取样,每周测定1次.取样时准确量取50.0 mL试验溶液于分液漏斗中,分别加入15 .OmL甲苯,充分振荡萃取,取萃取液,氨吹至干,用0.50 mL乙腈水溶液（V乙腈：V超纯水等于l:1）溶解,摇匀,经0.22 μm滤膜过滤后上机测定.测定所用仪器为WatersAcquity-Are高效液相色谱仪；色谱柱型号为CORIECS C18(4.6x50 mm),粒径2.7μm；柱箱温为30℃；检测器为紫外检测器；检测波长为290 nm;流动相为超纯水和乙腈,比例为23%：77%；每次进样体积为20.0μL.
1.3.2试验设计
参照OECD N0 210鱼类早期生活阶段毒性试验的方法【3】进行,根据预备试验结果,设计浓度分别为O.OOl0、0.0020、0.0040、0.0080和0.016 mgfl,,试验设计1个空白对照组,每个浓度3组平行,每个平行20枚胚胎.试验采取半静态暴露方式,每天至少更换3/4试验溶液.0—21d时试验溶液体积为500 mL,21 d—34 d时试验溶液体积为2L.试验用水为添加盐酸调pH至6.5曝气自来水.
在倒置显微镜下观察其对胚胎的亚致死效应和致畸效应,并且每天观察记录胚胎和仔鱼的死亡情况,在试验结束时测量存活仔鱼全长,然后分别并各平行组的存活试验鱼,安乐处死后在60℃条件下将试验鱼烘干至恒重,并计算其平均干重.
2 结果
试验结果表明,试验溶液中毒死蜱测定浓度与理论浓度相比,相差均不超过20%,故以理论设置浓度对试验结果进行相关计算.
由表1可知毒死蜱对斑马鱼早期生活阶段的体长和体重有不同程度的抑制作用.以体长计算的毒死蜱对斑马鱼早期生活阶段毒性的NOEC为0.0040 mg/L,LOEC为0.0080mg/L；以干重计算的供试品对斑马鱼早期生活阶段毒性的NOEC为0.0040 mg/L,LOEC为0.0080 mg/L.
由图l看出,在试验0—12d时,胚胎及仔鱼的死亡率较低,没有什么变化,在12—18 d时仔鱼的死亡率上升较快,0.016 mg/L处理组在18 d时死亡率达到38.3%,此后各浓度处理组累计死亡率趋于稳定.
3讨论
研究表明毒死蜱对斑马鱼早期生活阶段的致死及体长、干重均表现出良好的剂量效应,与空白对照组比,低浓度处理组对斑马鱼仔鱼体长和体重抑制效果不显著,高浓度处理组则对体长及体重产生显著的抑制作用.毒死蜱对斑马鱼早期生活阶段毒性的NOEC体长为0.0040 mg/L、NOEC体重为0.0040 mg/L,具有较高的毒性风险.文章选取的斑马鱼早期生活阶段发育过程中的体长和体重两项亚致死效应指标,对毒死蜱的毒性效应都较敏感及稳定.在试验过程中,12d时累计死亡率的有明显上升趋势,推断是此时仔鱼完全吸收卵黄囊养料,需要从外部摄取食物,而毒死蜱经肠胃吸收后对仔鱼起明显致死效应.
以上结果表明,毒死蜱对斑马鱼早期生活阶段的毒性作用不容忽视,在田间施用药剂时,需要注意避免对河流湖泊等水体的污染,并且着重保护该生命阶段的鱼类.
参考文献
【1】张恒敏．农药品种手册[M]北京：化学工业出版社,2012:41-42
【2】农药检定所．中国农药信息网[EB/OL].2018 -05-01
【3】OECD. Test No.210: Fish Early-life Stage Toxicity Test[S].1992．
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