牛大力根、茎、薯中醇溶出物成分对比分析,本文是分析方面论文范文集跟牛大力和牛大力根和对比分析相关论文如何怎么撰写.
分析论文参考文献：
摘 要：以同株牛大力根、茎、薯部分为原料,采用超声波助溶法在不同乙醇浓度（0%、10%、20%、30%、40%、50%、95%）对牛大力根、茎、薯的醇溶物成分中的黄酮、皂苷、生物碱进行研究.实验结果为：随着乙醇浓度的增大,牛大力根、茎、薯中黄酮、皂苷、生物碱溶出率均呈上升趋势,三者关系为根＞薯＞茎；不同乙醇浓度和根茎薯之间的差异均对黄酮、皂苷、生物碱溶出率呈非常显著性影响（P ＜ 0.01）.
关键词：牛大力醇溶物；黄酮；皂苷；生物碱
中图分类号：S567.239
牛大力（Millettiaspeciosa Champ）产于亚热带地区,为豆科崖豆藤属植物,其根部、茎部在民间广泛作为药食两用植物,具有很高的营养和医药保健价值[1-3].在《陆川本草》中记载其具有“清肺止咳,清凉解毒；治咳血,痢疾,温病身热口渴,头晕”之功效；在《生草药巧备要》中也表明其可壮筋活络,补虚润肺,可治疗腰腿痛、风湿痛等.近年来对牛大力化学成分的研究表明,牛大力的有效活性成分主要为黄酮类、糖类、皂苷类和生物碱化合物.且牛大力的醇溶提取物[4] 具有较明显的抗炎、免疫调节作用以及抗氧与清除自由基的功能,是一味具备多种药理作用和良好保健功效的中草药[5-6].而且,民间用其不同组织部位泡酒作药也很多,其主要目的是强筋壮骨.
目前,国内外对牛大力研究的相关文献较少,尤其是对牛大力醇溶物的研究更是少之甚少.以同株牛大力根、茎、薯部分为原料,分析醇溶物成分中的黄酮、皂苷、生物碱的溶出规律,为进一步了解牛大力醇溶物方面研究提供理论依据和研究牛大力为何在民间被广泛食用和应用提供有价值的参考.
1 材料及方法
1.1 试剂与仪器
牛大力根茎薯均采于钦州钦北区黄大力中药材料种植合作社,3 年生.芦丁（标准品）、人参皂苷（标准品）、盐酸小檗碱（标准品）,均为上海金穗生物科技有限公司；无水乙醇（AR）、亚硝酸钠（AR）,天津市福晨化学试剂厂；香草醛、正丁醇、高氯酸等,广州化学试剂厂.
SCIEBTZ-IID 超声波细胞粉碎机,宁波新芝生物科技股份有限公司；UV-1800 紫外可见分光光度计,岛津仪器；ME204E 分析天平,梅特勒- 托利多仪器（上海）有限公司；V-100 旋转蒸发仪,瑞士步琦有限公司.
1.2 实验方法
1.2.1 黄酮标准曲线的绘制
分别取0、0.04、0.08、0.12、0.16、0.20、0.24 mg芦丁含量的标准溶液,加5%NaNO2 溶液0.3mL,静置6 min 后加10%Al(NO3)3 溶液0.3 mL,静置6 min 后再加入4%NaOH 溶液10 mL,50%乙醇溶液定容25 mL,摇匀,静置15 min 后,510 nm 测定吸光度[1-2].并以吸光度y 为纵坐标,溶液中芦丁浓度x 为横坐标作图,得的回归方程y等于0.0818x-0.0016（R2等于0.9986）.
1.2.2 皂苷标准曲线的绘制
分别取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg 人参皂苷含量的标准溶液,挥干溶剂后加入5% 香草醛- 冰乙酸溶液0.2 mL,高氯酸溶液0.8 mL,60 ℃反应15 min,冷却后加入冰乙酸溶液5 mL,摇匀静置20 min[7-8].560 nm 测定吸光度.并以吸光度为y 纵坐标,溶液中人参皂苷浓度x 为横坐标作图,最终所得回归方程为y等于0.7726x-0.0213（R2等于0.9968）.
1.2.3 生物碱标准曲线的绘制
分别取0、0.15、0.30、0.45、0.6、0.75、0.9 mg 盐酸小檗碱含量的标准溶液于 25 mL 比色管中,加入3 mL溴甲酚绿,4 mL 柠檬酸- 柠檬酸钠缓冲液及5 mL 氯仿,用蒸馏水定容至刻度线,充分振荡后静置1 h,414 nm 测定吸光度.以吸光度y 为纵坐标,溶液中盐酸小檗碱溶液浓度x 为横坐标作图,最终所得回归方程为y等于1.055x+0.0293（R2等于0.9962）.
1.2.4 牛大力根、茎、薯部醇溶物的制备及成分含量测定
将牛大力根（茎、薯）用中药材粉碎机粉碎,用60 目筛筛出,并保存于干燥器中备用.称50.00 g 牛大力根（茎、薯）粉末,根据料液比1 ∶ 20（W/V）加入不同浓度的乙醇溶液（0%、10%、20%、30%、40%、50%、95%）,超声粉碎1 h（400 W）,取出冷却后过滤,将滤液收集好.滤渣根据上述方法继续提取,重复2 次,合并滤液.把滤液置于旋转蒸发器中,在55 ℃下减压旋转蒸发,直到蒸发浓缩液至无乙醇气味,把得到的浓缩膏冷冻干燥即可得到牛大力根的乙醇提取物.
精确称取1 g 牛大力醇溶物冻干粉,使用与标准溶液相同的溶剂定容至100 mL.按照黄酮、皂苷、生物碱标准曲线的测定方法测试吸光度,计算对应得率.
2 实验结果及分析
2.1 牛大力根、茎、薯部醇溶物质量
牛大力根部醇溶物的重量为3.106 g,茎部醇溶物的重量为2.014 g,薯部醇溶物的重量为2.524 g.
2.2 乙醇浓度对牛大力总黄酮得率的影响
由图1 可知,牛大力根、茎、薯中总黄酮的得率随乙醇浓度的增大而升高,但三者上升趋势并不平行,呈散射状,即不同酒精浓度的溶出率不同,说明三者之间总黄酮醇溶效果差异不仅仅是总含量不同造成的,而是很大程度上受到3 种部位组织结构差异的影响.并且,三者都在乙醇浓度为95% 时有最大得率,其中三者上升速度规律为：根＞薯＞茎.
2.3 乙醇浓度对牛大力总皂苷得率的影响
由图2 可知,牛大力根、茎、薯中总皂苷的得率随乙醇浓度的增大而升高,这与众多豆科皂苷的乙醇溶解性相似,其不同乙醇浓度的溶出增率的差异是由牛大力根、茎、薯中皂苷含量差异引起.并且,三者均在乙醇浓度为95% 时获得最大得率,其中三者上升速度规律为：根＞薯＞茎.
2.4 乙醇浓度对牛大力生物碱得率的影响
由图3 可知,牛大力根、茎、薯中总生物碱的得率随乙醇浓度的增大先升高后下降,生物碱分子结构中氮原子的存在状态、分子大小、分子中极性基团的种类和数目直接决定了分子的极性状况,在95% 乙醇中有较强的氢键极性,大大限制了生物碱牛大力生物碱的溶出.而牛大力根、茎、薯都在乙醇浓度为50%时有较大的得率,其中三者上升及下降速度规律均为：根＞薯＞茎.
2.5 乙醇浓度及不同组织对黄酮、皂苷、生物碱得率的影响
由表1、2、3 可知,P ≤ 0.01,这说明不同组织结构及乙醇浓度对这4 种物质得率的影响都是极其显著的.但是,乙醇浓度较不同组织结构对黄酮、总皂苷的得率影响更为显著[9],若是只做针对相关牛大力总黄酮或总皂苷的实验,则要优先考虑对乙醇浓度的选择,再根据条件对不同组织结构进行选择.
再由表1 可知,P ≤ 0.01,说明乙醇浓度对牛大力根、茎、薯中总黄酮得率的影响是极其显著的,其原因主要是：根据相似相溶原理,浓度越高其极性越大,则得率随浓度的增大而升高[10].而对于不同部位,牛大力黄酮的制备在P等于0.001,得率随浓度的减少而降低.所以,今后要做相关以牛大力总黄酮为研究对象时,要考虑乙醇浓度对它的影响.
总皂苷的溶出通常受溶剂影响较大[11],由表2 及图2 可知,P ＜ 0.01,则乙醇浓度对牛大力根、薯中总皂苷得率的影响是极其显著的.而对于牛大力茎来说,乙醇浓度影响P ＞ 0.05,即乙醇浓度对牛大力茎中总皂苷得率的影响是不显著的.所以,今后在以牛大力茎为对象的综合开发中,利用总皂苷时可以不再主要考虑乙醇浓度的影响.
再由表3 可知,P ＜ 0.01,则乙醇浓度对牛大力根、茎、薯中生物碱得率的影响是极其显著的,而不同组织部位较乙醇浓度对生物碱的得率影响更为显著,这意味着对于牛大力根而言,更能体现出生物碱的功效活性.而在食品加工中,牛大力薯则因为生物碱的量适中更适宜在相应产品中添加.而图3 数据中,乙醇浓度对牛大力茎中生物碱得率的影响0.01 ＜ P ＜ 0.05,依旧是显著的,但考察牛大力茎综合利用比如以生物碱为研究目的时,是否考虑乙醇浓度的影响可以试生产需求而定.
2.6 牛大力根中黄酮、皂苷、生物碱的溶出
目前,牛大力多是药食两用,其处理和炮制的方法,很大程度上就是黄酮、皂苷、生物碱的适量溶出和配伍.由图4 可知,牛大力根部中各成分得率[12] 为：总黄酮＞生物碱＞总皂苷.其得率开始与总皂苷和生物碱的得率持平[13]；在浓度为50% 时,各成分得率为：总黄酮＞总皂苷＞生物碱.
3 结论
采用超声波辅助对以牛大力根、茎、薯部为原料,在不同乙醇浓度下对其醇溶物中总黄酮、总皂苷、生物碱得率进行测定.实验结果如下：①牛大力根、茎、薯中总黄酮的得率随乙醇浓度的增大呈上升趋势,且三者都在乙醇浓度为95% 时有最大得率,其中三者上升速度规律为：根＞薯＞茎.②牛大力根、茎、薯中总皂苷的得率随乙醇浓度的增大呈上升趋势,且三者都在乙醇浓度为95%时有最大得率,其中三者上升速度规律为：根＞薯＞茎.③牛大力根、茎、薯中总生物碱的得率随乙醇浓度的增大呈先上升后下降的趋势,且三者都在乙醇浓度为50% 时有较大的得率,其中三者上升及下降速度规律均为：根＞薯＞茎.④不同组织结构及乙醇浓度对总黄酮、总皂苷、生物碱得率的影响都是极其显著的.但是,乙醇浓度较不同组织结构对总黄酮、总皂苷的得率影响更为显著；而不同组织结构较乙醇浓度对生物碱的得率影响更为显著.⑤在牛大力根、茎、薯部中各成分含量规律为：总黄酮＞生物碱＞总皂苷.
4 展望
如果要向牛大力产品生产销售方向发展,比如进行牛大力药酒生产,那么在生产的过程中就要考虑乙醇浓度问题.通常我们饮用的泡制酒的酒精度为18°～ 55°,如果产品是采用高浓度酒精生产的话,后期还需要勾兑才能销售.这不仅增加了工艺难度,也存在食品安全风险,影响产品质量的稳定性.而如果是提取深加工利用,那么可以考虑采用高浓度乙醇进行研究.此外,对于本实验中生物碱得率随乙醇浓度在0% ～ 50% 呈上升趋势,而随乙醇浓度在50% ～ 95% 呈下降趋势,但得率在乙醇浓度为50% 后下降趋势并不太快,说明应该有个上顶点位置,为生物碱最大溶出值.但由于本实验量太大,并没有对乙醇浓度在60% ～ 90% 进行实验,所以本次实验并不能说明牛大力生物碱得率在乙醇浓度为50% 时就是最大得率.那么,在今后做有关针对牛大力生物碱的实验时,可以考虑在乙醇浓度为60% ～ 90% 进行研究,找出牛大力生物碱最大得率时最适的乙醇浓度.
本次只对三年生的牛大力根、茎、薯进行了对比实验,得出的结果不能很好地体现出几年生的牛大力的各成分含量高些,也不能体现出几年生的牛大力药用价值更高.那么,在后续的研究中,可以选择几组不同年份的牛大力根、茎、薯在不同的乙醇浓度下进行研究,让我们在平时生活和生产中,能最大程度地利用牛大力的价值.
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