猪尿液中盐酸克伦特罗（）检测方法比较试验,该文是关于检测方法相关毕业论文格式范文与盐酸克伦特罗和瘦肉精和猪尿液有关论文如何怎么撰写.
检测方法论文参考文献：
摘 要：本文运用竞争酶标免疫法(ELISA)与快速检测试纸条法分别对73份生猪尿样本进行测试.再利用固相萃取一气相色谱一质谱分析方法(GC-MS)证实.测试结果：ELISA方法与GC-MS分析法符合率100%,而快速检测试纸条法与GC-MS分析法符合率为96.8%.
关键词：猪尿液：盐酸克伦特罗：检验：效果比较：
人类在食用含“”的猪肉后,因其具有残留性和稳定性,会致使人们动物性食物中毒,本次测试,是为寻求一种能准确且快速检测盐酸克伦特罗的方法.检测过程中使用盐酸克伦特罗快速检测试纸条法和ELISA-竞争酶标免疫法分别对73份生猪尿样本进行对比检验.再利用固相萃取一气相色谱．质谱分析方法(GC-MS)对以上2种检测方案结果实施确证.现把测试的过程和实验结果阐述如下.
1材料准备
①实验样本及来源：生猪尿液；养猪场、屠宰场.②样本数：73份.③样本保存：零下20℃冰箱储藏备用.④试剂准备：竞争酶标免疫试剂盒（包含试剂与标准品）,于北京望尔生物技术有限公司购买.盐酸克伦特罗快速监测试纸条（包含试纸条与滴管）,于广东省广东省农业科学院技术研究处购买.
2试验方法
2.1 ELISA-竞争酶标免疫法
2 .1.1测试材料与设备
ELISA试剂盒：测试肌肉、肝脏、尿液中的含量,其包含了所有测试用的试剂.需用微孔板酶标仪(450nm)用于定量分析.
2.1.2测试过程
把待检尿液2 000 g离心10 min后留用上层清液.测前把所有试剂与测试尿液放置室温19～25℃：把足量标准品／样本20μL导入微孔中,再加入酶标二抗50μL/孔.标准品与样本进行2个平行实验.记录各自位置；将抗体工作液80μL/孔利用稀释剂进行稀释后,再导入微孔中,然后将微孔口密封,室温放置15 min；将微子L内液体倒出后,把微孔架具倒立在吸水纸上,通过拍打和擦拭除尽孔中液体,然后将250μL试剂盒提供的洗涤工作液导入微孔中,再将微孔液体倒掉,重复2遍以上操作；仔细摄取20μL标准液和经过处理的样品溶剂导入微孔,同样利用准确溶液和样品溶液进行2个平行测试；导入酶标二抗50 μL物至微孔底面,将其均匀混合密封,室温孵育30 min后倒出液体.再次消释微孔中的液体,将250μL工作洗涤液导入微孔后,与上述步骤一样,倒掉微孔中的液体,重复进行两次操作；将发色剂和基质各100 μL导入微孔,继续利用振荡仪器进行振荡均匀,然后通过室温遮光孵育15 min;将终止液50μL/孔终止液导入微孔,振荡均匀.在微孔的450nm刻度处,借助空气让空白测试吸光度值.
2.1.3鉴定测试结果
检测结果≥5μg/L,判定为阳性<5 μg/L,检测结果,判定为阴性,盐酸克伦特罗的检出限为0.5μg/L.尿液稀释系数为1.
2.2盐酸克伦特罗快速检测试纸条法
2.2.1样品准备
尿液放置室温20—24℃.同样2 000g离心10min.留用上层清液进行测试.
2.2.2测试过程
分别向检测板孔中倒入标准品l、标准品2与80μg待检尿液；把此检测孔板条平衡固定于检测板,并与试纸共同置于25℃的冰箱中,注意不要将试纸条插入样品；15~20 min,将试纸条一起置于检测板孔中；同样,此时再次把检测固定板和试纸一起平衡放入4℃的冰箱之中.切勿将试纸取出检测孔,还要保证试纸是平放在检测孔底面的；放置8—lOmin后开始判定结果.
2.2.3检测结果判定过程及记录
将试纸和测试固定板共同置于4℃的冰箱之后进行计时,在8 min后观察发现标准品1的反应线条明显显现出棕红色,而相对于标准品l的反应线颜色标准品2要淡很多；10 min左右把待检测的样本反应线与标准品1、2颜色进行对比然后进行结果判定,若颜色浅,则盐酸克伦特罗的含量越多,颜色也深,则含量越少；若待检样本颜色与1的反应线颜色相比并不觉浅,则鉴定为未检出；若待检测样本颜色深度呈现在两者之间时,那么盐酸克伦特罗的含量的含量也同样介于标准品1与2之间,即0～5ng/mL；若待检样本其颜色深度明显浅于标准品2,那么它的含量则高于标准品2的含量,即> 5ng／mL.
2.3固相萃取一气相色谱一质谱分析法
GC-MS分析方法是全球统公认的检测克伦特罗残留的证实方法,这种方式是通过将盐酸克伦特罗在离子与C18固相萃取柱上萃取.不同度数的克伦特罗萃取回收率为75%—95%,最低检测度数为0.5ng/mL,而它的硅烷化产物,利用选取离子的形式进行检验 (86、243、262、277).
3结果
经过对73份样本猪尿液中盐酸克伦特罗检测获悉：其中有l份的生猪尿液通过快速检测试纸条法检测后显示克伦特罗含量> 5ng/mL,呈阳性.而利用ELISA方法对73个猪尿样本进行测试时,没有发现阳性样品,即是表明盐酸克伦特罗含量5ng/L.最后利用GC-MS分析法对73份样本进行确证,样本中其含量都未达到5ng/L,即GC-MS分析方法测试为阴性.
4结语
通过此次试验,笔者认为,为确保测试的精确性,利用ELISA方法对样本猪尿液中的盐酸克伦特罗进行检测后,再利用GC-MS分析方法对可疑的、呈阳性的样本进行确证,这样检测的效果相比盐酸克伦特罗快速检测试纸条法更好,同时也节约了人力与成本.
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