猪尿中沙丁胺醇的常用检测方法与其进展,该文是检测方法相关学年毕业论文范文与沙丁胺醇和常用检测方法和猪尿相关学年毕业论文范文.
检测方法论文参考文献：
摘 要：沙丁胺醇（Salbutamol,SAL）,是一种人工合成的肾上β2 -受体激动剂,医学上可以用于治疗支气管炎或支气管哮喘所导致的支气管痉挛,在饲料添加中可有效提高瘦肉率,而人食用含沙丁胺醇较高的动物组织后会出现肌肉颤动、肌痛、头痛,甚至恶心、呕吐等中毒症状.鉴于沙丁胺醇在尿液中存在的时间较长,尿样易于采集,本文综述了猪尿中沙丁胺醇的检测技术及进展,以期为监管部门检测沙丁胺醇提供理论依据和操作参考.
关键词：猪尿；沙丁胺醇；检测进展；检测
中图分类号：S816.17 文献标识码：A 文章编号：1008-6137（2016）05-0014-03
0 引言
沙丁胺醇做为一种克伦特罗的替代物,同样可以使饲养动物的脂肪率降低,并加快蛋白质的合成,提高瘦肉的含量.人食入过量的沙丁胺醇会引发肌肉颤动、肌痛、头痛,甚至恶心、呕吐等中毒症状[1-2].由于猪尿易于获得,且沙丁胺醇代谢后在猪尿中的存留时间明显高于血浆,所以从猪尿中检测沙丁胺醇是目前应用于产品源头检测的最好方法.
1 常用检测方法
1.1 酶联免疫吸附法（ELISA）
1.1.1 间接竞争性酶联免疫法
根据抗原抗体特异性结合的原理,以及酶化学反应的特点,通过人工合成抗体,来完成对猪尿中沙丁胺醇含量的检测.利用间接竞争酶免疫测定法,可以快速测定猪尿中沙丁胺醇的含量,并且操作相对简单,检出限也在不断降低.检测限可达到0.2 μg/L[1] ,但是由于ELISA的自身限制,多种因素都会影响到检测的结果,尤其洗板操作对结果的影响更为明显[2].现在很多生物客户公司也推出了ELISA的检测试剂盒,并且低廉,灵敏度同样较高,是现在较为实用的一种检测手段.
1.1.2 直接竞争性酶联免疫法
直接ELISA是一种较间接ELISA更为快速的方法.因为利用此法只需要进行一次孵育和洗板,可以大大缩短时间,可由于此法交叉反应较多且灵敏度较低一直没有得到广泛应用.目前王保玲等人建立的直接竞争性ELISA,利用高碘酸钠法制备的辣根过氧化物酶标记沙丁胺醇单克隆抗体,在包被抗原质量浓度为1μg/mL,酶标抗体稀释2560倍,0.01mol/L、pH7.4的PBS中含体积分数0.05%的Tween-20、0.5mol/L NaCl溶液和体积分数5%的甲醇的条件下,可达到检测限0.049mg/mL[3].
1.2 荧光免疫分析法
荧光免疫分析法是一种利用荧光素对抗原或者抗体进行标记,对猪尿中存在的沙丁胺醇进行定量的分析.荧光免疫分析法相较于ELISA他的灵敏度更加突出,甚至可以到达痕量检测的级别[4].但是,此法标记时会应用到放射性元素或同位素,这种缺陷使得此法不能得到普及.近年来,随着科技的不断发展,可以利用非放射性荧光剂,如稀土离子,来进行标记[5].减少了标记过程中可能会产生的辐射污染,但由于成本难以控制下来,在实际应用中很少使用这种方法进行测定.侯文慧利用铕标记法将此法对于沙丁胺醇的检测限提升到0.136 ng/mL,并成功降低与克伦特罗的交叉反应（2.29%）[6].
1.3 胶体金免疫层析技术
胶体金与沙丁胺醇发生了特异性结合后,通过层析法来确定是否在尿液中含有沙丁胺醇.利用此法可以检测出沙丁胺醇的残留,但不能检测出尿样中所含沙丁胺醇的实际浓度.虽然应用这种方法会出现一定比例的假阳性的现象,灵敏度也相对较低,但由于这种方法的操作简单,费用低廉而且快速便捷,因此广泛应用于大批量样品的初筛环节.吴巧丽等优化操作步骤后提高了此法的特异性,降低了沙丁胺醇与克伦特罗的交叉反应[7].胶体金技术现在被广泛的应用在猪尿快速检测测试卡上,有诸多公司研制了沙丁胺醇胶体金快速检测卡,首先制备胶体金标记抗体,然后将其喷涂于胶体金结合垫,并与样品垫、硝酸纤维素膜（NC膜）、吸水纸及塑料底板组装[8]从而得到胶体金快速检测卡.在实际的筛查中,这种检测卡占据了很大一部分的比例.
1.4 液相色谱法
液相色谱法是一种以液体作为流动相的色谱法,具有高灵敏度和高精度,可有效的降低假阳性的比例.检测过程中先对样品进行初步的提取和净化,再将处理过的样品进行上机测定.利用液相色谱法可以同时对4种不同的β-兴奋剂线性范围为0.05~1.0 μg/mL[9].Zhang等将液相色谱法与一种新型的在线化学发光测定相结合,使同时测定猪肝中多种β-兴奋剂的灵敏度得到了很大的提升[10].然而在实际应用过程中,利用液相色谱法进行普遍测试需要的仪器成本较高,而且操作较为复杂,在实验室中应用可以高效的定量分析猪尿中沙丁胺醇的含量,但不适于现场测量.
1.5 液-质联用法
即液相色谱-串联质谱法.这是一种具有极高的灵敏度的检测方法,可以定性定量的对猪尿中所含的沙丁胺醇进行检测.该方法准确度、精密度和线性范围等各项技术指标较好,适用于饲料中β-肾上腺素能激动剂的测定[11].但是由于该项技术的所需的仪器成本昂贵,且操作复杂,多数用来于实验室中分析检测使用.
2 小结
的非法添加屡禁不止,因此对于沙丁胺醇等添加物的检测也就尤为重要.随着科技的不断发展与进步,现如今的检测方法变得越来越完善,各种检测方法都在朝向实用方向进行发展.但由于检测技术本身的限制,没有一种方法可以同时进行筛查和确证.其中胶体金快速检测卡因为其本身的廉价和快速,成为一种被广泛使用于一线检测的方法.因此快速检测卡的开发和优化是将来最具有商业价值和应用价值的产品.
参考文献
[1] 张静,张改平,职爱民,等.沙丁胺醇ELISA方法的建立及应用[J].中国食品学报,2014（6）：194-199.
[2] 钟筑宁,谷俊莹,肖,等.对影响ELISA实验质量的有关因素分析[J].贵州医药,2005,29（12）：1131-1132.
[3] 王保玲.沙丁胺醇直接竞争ELISA法快速测定[J].食品科学,2010（20）：270-274.
[4] 胡静,李立新,罗俐梅,等.全自动间接免疫荧光法分析仪检测抗核抗体与人工判读的对比研究[J].华西医学,2016,31（6）：1084-1087.
[5] 张振亚；梅兴国.现代荧光免疫分析技术应用及其新发展[J]. 生物技术通讯,2006,17（4）：677-680.
[6] 侯文慧.沙丁胺醇铕标记时间分辨荧光免疫分析方法的建立[J].食品研究与开发,2016,37（7）：154-160.
[7] 吴巧丽.叶春生胶体金免疫层析技术快速检测沙丁胺醇残留[J]. 现代食品科技,2012,28（11）：1595-1599.
[8] 韩京朋,吴小平,邱检萍,等.动物尿液中沙丁胺醇残留检测试纸条的研制[J].黑龙江畜牧兽医,2014,（4）174-176.
[9] 白玉慧,刘志宏,徐士新.沙丁胺醇残留检测技术研究[J].农产品质量与安全,2016,0（1）：52-56.
[10] Zhang Y T,Zhang z J,Sun Y H,et al .Development of anAnalytical Method ForThe Determination of Beta(2)-Ag?onist Residues In Animal Tissues Y High-PerformanceLiquid Chromatography With On-Line Electrogenerated[Cu(HIO6)2]5--Luminol Chemiluminescence Detection[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2007,55(13):4949-4956.
[11] 贾涛,刘辉.液相色谱-串联质谱法同时检测饲料中13种β-受体激动剂[J]. 饲料研究,2014（3）：55-57.
[12]栗艳“. ”的危害及防治[J].中国畜牧兽医文摘,2011,27（4）：175.
*通讯作者：王琤韡.
收稿日期：2016-10-24
总而言之：该文是关于经典检测方法专业范文可作为沙丁胺醇和常用检测方法和猪尿方面的大学硕士与本科毕业论文检测方法论文开题报告范文和职称论文论文写作参考文献.
雾化吸入沙丁胺醇与布地奈德对支气管哮喘急性发作的疗效观察
李月霞（安徽省黄山市徽州区潜口镇中心卫生院 安徽 黄山 245900）【摘 要】目的评价雾化吸入沙丁胺醇及布地奈德联合治疗支气管哮喘急性发作的临床疗效 方法选取在我院就诊的支气管哮喘急性发作患者共74.
玉米醇溶蛋白检测方法
刘振宇,徐佳璐（哈尔滨国家粮油质量检测中心,黑龙江哈尔滨150070）摘要玉米是我国北方主要的饲用粮品种之一,而玉米醇溶蛋白存在于玉米的胚乳中,是玉米蛋白中的主要成分之一,然而这种蛋白不能够被动物吸收.
小儿哮喘急性发作通过沙丁胺醇联合布地奈德治疗的效果分析
摘要目的探讨小儿哮喘急性发作通过沙丁胺醇联合布地奈德治疗的效果 方法研究对象为我院2016 年3 月至2017年2 月期间收治的80 例小儿哮喘急性发作患者,随机分为对照组与观察组各40 例,对照组运.
猪尿石症的形成原因、临床特征与其综合疗法
孙广义(黑龙江省牡丹江市阳明区五林镇畜牧站,黑龙江牡丹江157035)摘要尿石症也叫做尿路结石、尿石病,是尿道结石、输尿管结石、肾结石和膀胱结石的总称,是由于尿路中存在盐类结晶的凝结物,导致尿路黏膜受.