神农架贝母多糖提取,该文是多糖提取方面有关毕业论文怎么写跟贝母和神农架和多糖方面论文写作参考范文.
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摘 要：以神农架贝母为原料,在单因素试验基础上,采用响应面法研究了提取温度、时间和液料比对金钗石斛多糖提取的影响,建立了二次回归模型,得到了提取工艺的最佳条件为提取温度为90℃,提取时间为4h,料液比为1：50,经纯化后贝母多糖的纯度为91.90%.
关键词：贝母；响应面法；多糖
0引言
贝母作为一种药用植物,其昂贵、资源并不丰富、但其含有多种天然化合物.多糖是贝母中有效活性成分的一种,贝母多糖实际是一条糖链,而这个糖链是由不少于10个的单糖通过糖苷键结合而组成的一种聚合糖,这种聚合糖是一种高分子碳水化合物,通常用通式（C6H10O5）n来表示.贝母多糖并不是一种单一的化学物质,而是一种混合物,这种混合物是由聚合程度不同的几种物质混合组成.经长期研究发现,贝母多糖具有抗肿瘤、抗衰老、抗氧化等生物活性,因其没有任何毒副作用,而且应用化学手段就可以很容易的控制其药物质量等特点,所以贝母多糖已经为如今的新药研发、绿色食品添加剂、功能保健品等开辟了新的研究思路与方向[1-2].本研究以神农架贝母为素材,建立了贝母水溶性多糖的响应面提取方法.
1材料与方法
1.1材料
贝母采自湖北省神农架林区,乙醇、硫酸、苯酚、氯仿和正丁醇等均为分析纯,购自自中国药品生物制品检定所.
1.2试验方法
1.2.1多糖的提取与检测.称取贝母粉末,采用水提醇沉的方法提取多糖.多糖的检测采用苯酚-硫酸法[3].
1.2.2单因素试验和响应面优化试验.单因素实验研究A（液料比）、B（提取温度）和C（提取时间）对多糖提取的影响,在单因素分析基础上,确定三种因素的3个最适水平值,进行多因素响应面优化试验.进一步通过Box-Behnken的中心组合试验优化多糖提取工艺[4].
1.2.3多糖的分离和纯化.多糖的分离和纯化参照文献6中的方法[3].
2结果与分析
2.1多糖提取工艺条件单因素试验结果和响应面优化实验
在单因素检测时,液料比50：1、提取温度90℃和提取时间3h时,多糖的吸光值为最大值.综合考虑温度对多糖的影响,以吸光值为检测指标,考察三因素对贝母多糖提取的影响,按照Box-Behnken设计,具体见表1.
按照Box-Behnken设计因素水平,具体实验结果见表2.
利用Design-Expert8.0.6软件,对表2结果进行统计分析,得到三元二次回归方程式：
Y等于1.50317+7.32325×10-3A-0.055070B-0.18436C+6.4×10-5AB+1.5425×10-3AC+3.5625×10-3BC-1.7865×10-4A2+4.5035×10-4B2-0.01904C2
利用Design-Expert8.0.6软件,进一步对实验结果进行统计分析,结果见表3.
由表3可知,A、B、C和BC项对响应值影响极显著（P<0.01）,AC项对响应值影响显著（0.01<P<0.05）.判定系数R2等于0.9988,说明模型显著,相关性非常好,实验因素对响应值有较大影响.校正判定系数R2Adj等于0.9973,表明99.73%的实验数据的变异性可以用此回归模型解释.变异系数CV等于2.23%,说明实验的可信度及精确度较好.精密度为81.146.模型F值为662.53,表明该模型达到极显著水平（P<0.01）.此外失拟项为6.43（P等于0.0521>0.05）,说明失拟值和纯误差没有显著性关系,回归模型在被研究的整个回归区域不失拟,该模型能用于指导实验.进一步对模型进行两因素效应分析,结果见图1.
2.2多糖提取最佳条件极其验证实验
通过软件（DesignExpert8.0.6）分析得到多糖提取的最佳提取条件为料液比为50：1,提取温度为90℃,提取时间为4h,在此条件下吸光度的预测值为0.9512.为了验证该响应面结果的可行性,对所得最佳条件进行了优化和验证实验.在最佳提取条件下进行了5次重复实验,所得吸光度分别为0.9627、0.9412、0.9687/0.9572和0.9606,平均值为0.9581,与预期吸光度0.9512相符,SD和RSD分别为0.01032和1.08%,呈现出良好的重复性.证明此最优条件符合该实验的操作.采用Sevag法（即氯仿与正丁醇的比例为3：1）脱蛋白后,加入3倍体积的无水乙醇醇沉多糖,得到的多糖经检测纯度为91.90%.
3结语
在单因素试验的基础上,通过响应面法建立了神农架贝母多糖提取的最佳条件是：料液比为50：1,提取温度为90℃,提取时间为4h.在此条件下提取和纯化后的多糖纯度达到91.9%.
参考文献
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[3]鄢又玉.火棘果活性成分分析制备及其制剂基质研究[D].华中科技大学,2016.
[4]杨涛.人参属药用植物珠子参多糖成分研究[D].武汉轻工大学,2016.
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