新西兰的砧木分子辅助育种流程,该文是关于流程相关论文写作资料范文和砧木和育种和新西兰有关论文参考文献范文.
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新西兰的苹果品种选育在全世界享有盛名,相比之下苹果砧木品种的选育稍有逊色,但也已培育出了不少砧木优系,随着分子辅助育种手段的应用,更加快了他们砧木育种的步伐.新西兰的苹果砧木育种单位主要是植物与食品研究所,20 世纪80 年代,Stuart Tustin 博士以Aotea 和Robusta 5 为亲本与M9杂交,经过一系列筛选评价最终获得7 个砧木优系.Mike Malone 于1993 年开始选育抗苹果绵蚜、疫腐病及火疫病的砧木新品种,截止2013 年,已有20 多个优系进入了商业测试阶段.
目前由Vincent Bus 博士负责新西兰植物与食品研究所的砧木育种项目,他以M9 与CG 系列和其他抗性系列作为亲本材料,每年配置3~5个组合,获得8 000~10 000 株杂交实生苗.Vincent Bus 已经开始将分子标记作为辅助工具应用到了苹果砧木育种中,如矮化基因（Dw1）、抗苹果棉蚜基因（Er1 和Er2 ）和抗苹果火疫病基因（FBR5）等,他希望通过基因聚合效应来培育持续多抗的砧木品种.砧木杂交后代苗期首先进行疫腐病筛选,接着进行绵蚜的抗性筛选,剩余的单株再进行不同性状的分子标记确认（Dw1, Er1, Er2 和FBR5）最后将符合条件的单株进行繁殖,嫁接皇家嘎拉后定植到田间进行其他指标测试,对照砧木为M9、CG202 和MM106,定植在同一试验田作为参照砧木品种,田间测试3 年左右,测试性状包括长势、结果量、根蘖等性状,综合性状好的优系将进入商业果园评价,之后再进入商业苗圃测试和推广.现将新西兰的苹果砧木分子辅助育种流程加以介绍,以期对我国的砧木育种工作有所帮助.
1 杂交授粉
根据育种目标和可用资源的特性选择杂交亲本,于每年的9—10月份在田间完成杂交授粉（图1）.与我国田间杂交授粉操作最大的区别是去雄不套袋,选择一株或者某一枝,每个花序都授粉,去除萼片和雄蕊,不用套袋,授粉工作持续的时间较长,杂交果实（图2）收获时无花萼,便于区分.
2 种子收集保存
秋季（第二年的4—5 月份）果实成熟后,收获杂交种子,人工将种子取出,用消毒液[10%（质量分数,后同）次氯酸钠]浸泡15 分钟,室内晾干后保存在4 ℃冰箱中.
3 种子层积及温室育苗
冬季（第二年的5 月底至6 月初）,将杂交种子直接播种到穴盘内,每个穴盘播种一行嘎拉种子作为对照,然后将播种后的穴盘逐层摆放在用黑色塑料布包裹的中转箱中,运入冷库中贮藏6~8 周（图3）.7 月底至8 月初,将种子从冷库中移出,转入温室的苗床上,催芽育苗（图4）,并进行常规的除草喷药管理.
4 疫腐病的抗性筛选
当杂交幼苗长到4~5 片真叶时统计幼苗数量,之后进行疫腐病的接种鉴定.液体病菌由病理组培养,接种前将育苗床灌满水,水要刚刚淹没幼苗的根部,之后将疫腐病菌接种在幼苗根部的液体中（图5）.6 周后统计接种的结果（图6）.
5 绵蚜抗性的接种鉴定
疫腐病鉴定后,存活下来的抗疫腐病杂交苗,将从穴盘中移栽到营养钵中,继续存放在温室中培养,然后进行绵蚜抗性的鉴定.将事先培育的感染绵蚜的植株,转移到温室中与杂交后代共同培养（图7）,绵蚜会根据杂交单株的抗性选择危害（图8）,培养4 周后开始调查杂交单株的绵蚜危害情况,之后每两周调查一次,直到秋季杂交单株移出温室,感染绵蚜的杂交后代将被丢弃,抗绵蚜的将被保留.
6 苗期其他不良性状的筛选
秋末冬初将经过疫腐病和绵蚜抗性筛选的杂交后代转移到室外,同时剔除有根糵、气生根等不良性状的苗子（图9）.
7 分子标记鉴定
第三年春季,将经过抗病和不良性状筛选的杂交后代编号,提取每个单株的DNA,再送到分子标记课题组进行矮化、抗绵蚜和抗火疫病的分子标记的鉴定.
8 单株的繁殖与嫁接
将经过分子标记和田间抗性筛选的单株,种植到大的塑料盆或者田间,进行无性繁殖（图10）,每个杂交单株至少繁殖5 份,之后嫁接上皇家嘎拉（图11）定植到田间.
9 优良单株田间生长性状的调查
将优良单株与对照M9、CG202和MM106 一起嫁接嘎拉品种,并定植到田间,进行矮化性、生长特性、结果性状（图12）及产量的鉴定.
生长势：主要通过与对照的树体大小进行比较.分为强、中、弱3项.有根糵、气生根等不良性状的（图13）要被淘汰.
负载量：所有的单株不进行疏花疏果,每年负载量分为极低、低、中、中高、高、极高几个级别.结果量统计：单株定植到试验田第2 年后开始记录负载量,第1年15 个果,第2 年25 个果,第3 年40 个果,超过这些结果数的单株才被记录采收,统计果实的数量和质量,连续记录3 年.
生长量的统计：每年冬季测量嫁接部位以上20 厘米树干的横截面积,计算结果效率.
10 繁殖
通过试验田初步筛选的优良单株,每个优系设置2 米长的圃地进行繁殖,以测试其繁殖能力和苗圃性状（图14）.
11 商业果园测试和推广
将综合性状较好的优系进行繁殖,选择4 个商业果园进行测试,以常用砧木M9 和CG 系为对照,每个品种种植50 株,按商业果园模式管理,测试其综合表现,表现优异的优系被送到商业苗圃进行各项指标的测试,然后再由公司繁殖苗木进行商业推广.
涪陵：无人机现柑橘园打农药
2018 年6 月12 日,重庆涪陵罗云供销社农化服务机防现场会,在重庆涪陵南沱睦和村橙纽妞农业公司柑橘园举行.会上,使用无人机对果园喷洒农药,标志着涪陵果园第一次实现无人机打药（图1）.图1 无人机柑橘园打农药
会上,50 名橙纽妞农业公司的果农们,听了拜耳农药讲座,了解了柑橘防病虫知识.在柑橘园里,果品办的技术人员向身边的橙纽妞农业公司经理李伟说道：“这些柑橘树,该修枝整叶,否则对打药和保果不利”.数十名果农随着无人机的起飞抬起头,果农们第一次现场目睹无人机打农药.
“我家的龙眼、柑橘、枇杷树打药不愁了.家里全是老人,无人机打农药,解决了缺劳动力的问题.”果农王婆婆自言自语高兴地说.
随着我国农业的飞速发展,高效、智能化的植保无人机逐渐取代传统农耕模式.无人机的应用是现代农业果园的发展方向.无人机打药施肥,为高大果树提供了发展空间,一架无人机打药,通常是普通50 人一天的工作量.无人机还为农业果园载重,提供了无限的发展空间……
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