固相萃取HPLC法测定保健食品中的阿魏酸含量,本文是保健食品有关电大毕业论文范文和固相萃取和阿魏酸和阿魏酸含量相关论文如何怎么撰写.
保健食品论文参考文献：
马桂娟,朱燕燕
（宁夏回族自治区食品检测中心,宁夏银川750001）
摘 要：建立固相萃取HPLC法测定保健食品中阿魏酸含量的检测方法.样品中阿魏酸经甲醇- 甲酸（95∶5）提取后,经DionexOnGuard II RP柱净化.以1%乙酸溶液—甲醇（55∶45）为流动相,采用ZORBAX Eclipse XDB-C18柱（250 mm×4. 6 mm×5μm）分离,用DAD检测器在320 nm波长处检测,外标法定量.结果表明：阿魏酸的线性范围在5～50μg/mL,样品平均加标回收率在96.6%（n等于6）,RSD小于5%,最低定量检出限为0.3 mg/100g.该方法具有快速、灵敏、简便、准确等优点,能满足实际工作的需要.
关键词：固相萃取；高效液相色谱；保健食品；阿魏酸
中图分类号：R97 文献标识码：A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.18.019
阿魏酸具有抗氧化和清除自由基、抗血栓、降血脂、防治冠心病、抗菌、抗病毒、抗病变和防癌等作用[1],是用于改善免疫力、缓解体力疲劳类保健食品的功效成分,其质量状况直接关系到人们的身体健康.目前,国家尚未制定保健食品中阿魏酸检测的国家标准、行业标准,有关阿魏酸的检测方法大多是药材和中成药中阿魏酸含量的检测[2-5].但由于保健食品种类繁多,成分复杂,干扰因素多,在前处理方面与药物制剂和药材有很大不同.本文对样品预处理进行了改进,建立了采用固相萃取HPLC 法测定保健食品中阿魏酸的快速、灵敏、准确的检测方法,并用于实际样品的监测,获得了满意的结果.方法回收稳定,精密度好,为保健食品的安全监管提供便利.
1 材料与方法
1.1 仪器
高效液相色谱仪（1260）：美国Agilent 公司；萃取柱（Dionex OnGuard II RP 柱,2.5cc）：美国Thmero 公司；离心机（3K15）：Sigma 公司；氮吹仪（EVA50A）：北京普利泰科仪器有限公司；分析天平（BT25S）：赛多利斯科学仪器有限公司.
1.2 试剂与材料
对照品阿魏酸：中国药品生物制品检定所；甲醇：色谱纯,美国FISHER 公司；甲酸：色谱纯,美国Sigma 公司；乙酸：色谱纯,美国Sigma 公司；超纯水：由Milli-Q 超纯水系统制备,其他试剂均为分析纯；样品：市售某品牌鹿胎盘胶囊.
1.3 方法
1.3.1 色谱条件色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18 柱（250mm×4.6mm×5μm）；柱温：25 ℃；洗脱方式：1%乙酸溶液-甲醇（55∶45）为流动相等度洗脱；流量：1.0mL/min；检测波长：320 nm；进样体积：10μL.
1.3.2 标准溶液配制准确称取适量的阿魏酸标准品,用流动相配制成1.0mg/mL 的标准储备溶液,以流动相逐级稀释配制5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、30.0μg/mL、40.0μg/mL、50.0μg/mL 系列浓度的阿魏酸标准使用液.
1.4 样品处理
1.4.1 样品提取精密称量样品2.00g 于50mL 具塞离心管中,加入30mL 甲醇—甲酸（95∶5）,涡旋震荡2min,然后以8000r/min 离心5min,待净化.
1.4.2 样品净化采用Dionex OnGuard II RP 柱（2.5cc）净化,RP 柱用10mL 甲醇活化放置10min 后使用,取待净化清液过RP 柱（弃去前5mL 滤液）,准确移取2.0mL 净化液氮吹至干,然后用流动相定容至2.0mL,经0.22μm 有机相滤膜过滤后供液相色谱分析.
2 结果和讨论
2.1 检测波长的选择
通过对100μg /mL 的阿魏酸进行200~400nm 范围的紫外扫描,结果发现阿魏酸在320nm 有最大吸收.本文选择320nm为检测波长.图1 阿魏酸标准溶液200~400nm 光谱图.
2.2 流动相的确定
在ZORBAX Eclipse XDB-C18 柱上用甲醇———水作流动相分离保健食品中阿魏酸,阿魏酸峰型差.根据阿魏酸的化学性质,考虑采用酸性流动相可以获得较好效果.改用1%乙酸溶液替代水可以改变阿魏酸峰型,且能较好地与干扰杂质分离,图2 中峰1（tR等于5.34 min）为阿魏酸标准溶液的色谱峰,图3 是样品中阿魏酸色谱图（tR等于5.32 min）.
2.3 提取方式的确定
据文献报道,用甲醇∶甲酸（95∶5）作溶剂,阿魏酸稳定性良好[6].本试验采用振荡提取、超声抽提、漩涡提取等不同提取方法进行研究, 实验结果表明,称取样品约2.0g 于50mL具塞离心管中（3 份）,准确加入30mL 甲醇∶甲酸（95∶5）,分别振荡提取12h,超声提取20min,漩涡提取2min,静置,取上清液过Dionex OnGuard II RP 柱（2.5cc）净化后,色谱条件下进样10μL,结果见表1.
由表1 可知,振荡提取12h,超声提取20min,漩涡提取2min,含量基本无变化,因此为提高检测效率选用漩涡提取2min.最优提取阿魏酸条件是提取溶剂甲醇∶甲酸（95∶5）、提取方式漩涡提取2min.
2.4 固相萃取柱的选择
保健食品多属于中药复方产品,含有多种提取药材,功效因子相互干扰,功效成分不易分离、定量测定.本文使用Dionex OnGuard II RP 柱固相萃取柱是利用固体吸附剂将样品中的弱极性干扰物,如脂肪等保留,从而得到纯净的溶液,达到有效去除保健食品中杂质的目的.实验表明,经能获得较好的回收率,故采用Dionex OnGuard II RP 柱作为样品预处理柱.
2.5 回收率与精密度
精密量取2.0g 同一浓度样品6 份,每份加入浓度为0.50mg/mL 对照品溶液0.6mL,按文中1.4 项的操作方法进行处理与测定,并与标准曲线同时进行,以当时的标准曲线计算样品的测得浓度,求得本法的精密度与回收率,数据见表2.结果表明,有较好的回收率与良好的精密度,平均回收率为96.6%,其RSD为3.2%.
2.6 线性范围和检测限
本方法的线性范围为5.0μg/mL～50μg/mL.配制5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、30.0μg/mL、40.0μg/mL、50.0μg/mL 阿魏酸标准溶液,在选定的仪器条件下进行色谱分析,每个浓度点重复测定3次,测得峰面积平均值对浓度绘制标准曲线.
图4 标准曲线数据显示,阿魏酸在5.0μg/mL～50μg/mL表现出良好的线性关系,计算回归方程为Y等于41.09X-5.29,相关系数为r等于0.9996.
以3 倍基线噪音所相当的待测物质的量计算,当取样量为2g,进样量为10.0μL 时,保健食品中阿魏酸的检出限为0.3mg/100g.
2.7 样品测定结果
利用此方法对某品牌鹿胎盘胶囊进行检测,结果为32.67mg/100g.
3 结论
应用固相萃取HPLC 法测定保健食品中阿魏酸含量具有灵敏度高、精密度和准确度好等优点,可作为保健食品中阿魏酸含量分析的检测方法.Dionex OnGuard II RP 柱具有良好的吸附性能,能有效去除样品中的弱极性干扰成分,获得较好的回收率、重现性和较低的检出限.本方法简单、快速、经济,能够满足保健食品中阿魏酸的监测需要,适用于实验室批量检测分析.
参考文献
[1]欧仕益,包惠燕,蓝志东.阿魏酸及其衍生物的药理作用研究进展[J].中药材,2001,24(03):220-221.
[2]张惠,李祥,周红燕,等.HPLC 法测定脉络宁注射液中阿魏酸含量[J].医学进展,2008,32(12):556-558.
[3]毕跃峰,田野,裴珊珊,等.金银花化学成分分析[J].郑州大学学报,2007,39(02):184-186.
[4]李波霞,魏玉辉,段好刚,等.HPLC 法测定四物合剂中芍药苷和阿魏酸的含量[J].中国药房,2008,19(36):2853-2854.
[5]程东岩,王隶书,王海生,等.高效液相色谱法测定慈航颗粒中阿魏酸的含量[J].中国实验方剂学杂志,2008,14(11):16-17.
[6]黄罗生,郭健新,刘咏梅,等.HPLC 测定阿魏酸含量的探讨[J].中成药,2004,26(02):134-136.
作者简介：马桂娟,硕士,工程师,研究方向：食品检测.
归纳总结，这篇文章为适合固相萃取和阿魏酸和阿魏酸含量论文写作的大学硕士及关于保健食品本科毕业论文，相关保健食品开题报告范文和学术职称论文参考文献.
毒物分析中固相萃取技术的应用
李雪枫,叶波,黄霜(江苏省泰州市局,江苏泰州225300)摘要随着时代的进步以及科技的不断发展,分析技术也取得了不断的发展进步 在刑事毒物分析事件当中,各种先进仪器以及各种先进分析方法的引入,也推动了.
全自动固相萃取高效液相色谱测定蔬菜中灭蝇胺残留
摘 要建立了全自动固相萃取 高效液相色谱测定蔬菜中灭蝇胺的方法 样品切碎后,用甲醇 水溶液(9 ∶ 1,VV) 匀浆提取,提取液经全自动固相萃取仪净化,采用反相高效液相色谱分离,外标法定量 本法线性范.
银离子固相萃取气相色谱法检测食品中的反式脂肪酸
反式脂肪酸属于一种不饱和的脂肪酸,它有反式非共轭键的组成结构 氢化植物油是反式脂肪酸获取的主要来源 动物性的食品中的反式脂肪酸的含量相对较少 在医学生反式脂肪酸可以提高冠心病的发生率,影响人的血脂,并.
分子印迹固相萃取技术在食品农兽药残留检测中的应用进展
摘要分子印迹固相萃取技术（英文简称MISPE）,是当前食品安全样品采用的主要预处理检测技术,在实践运用中具备高效、稳定、全面……技术应用特点,受到检测机构的广泛认可和应用 本文从当前分子印迹固相萃取技.