用高效液相色谱（HPLC）检测原料乳和乳制品中三聚氰胺的原理和方法,本文是关于乳制品方面自考毕业论文范文与高效液相色谱和三聚氰胺和乳制品有关自考毕业论文范文.
乳制品论文参考文献：
摘 要：针对高效液相色谱法检测原料乳及乳制品中三聚氰胺的方法,国家发布了GB/T 22388-2008 和GB/T 22400-2008 两个推荐性标准,此两者均规定了指定色谱柱的使用.随着国内外色谱柱厂家生产的检测三聚氰胺的色谱柱不断增加,方法也应随之优化,本文所使用的方法仅适用于TechMate 色谱柱.
关键词：高效液相色法 三聚氰胺
高效液相色谱法（HPLC）是20 世纪60 年代后期发展起来的一种分析方法,被广泛应用于保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等方面.针对近年来一些不法商家在牛奶中添加三聚氰胺的案例,笔者所在单位加强了乳制品中三聚氰胺的检验工作,在执行标准GB/T 22388 和GB/T 22400 的基础上,摸索出另一种使用HPLC检测原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法,通过一段时间的实验,效果显著,现将该方法总结归纳如下,供业界参考.
1 基本原理
用50% 甲醇和乙酸铅溶液作为原料乳和乳制品的蛋白质沉淀剂与三聚氰胺提取剂,强阳离子交换色谱柱分离,高效液相色谱—紫外检测皿/ 二极管阵列检测皿检测,外标法定量.
2 试剂与材料
水：GB/T 6682 规定的一级水； 乙腈（CH3CN）： 色谱纯；磷酸（HO4）；磷酸二氢钾（KH2PO4）；三聚氰胺溶液标准物质：1.00mg/mL；乙酸铅溶液：称取22g 乙酸铅（准确至0.01g）,加水800mL 完全溶解后,用水稀释至1L,用滤膜过滤后备用；磷酸盐缓冲液：0.05mol/L（称取6.8g 磷酸二氢钾,加水800mL 完全溶解后,用磷酸调节pH 至3.0,用水稀释至1L,用滤膜过滤后备用）；一次性注射皿：5mL；滤膜：水相,0.45μm；针式过滤皿：有机相,0.45μm；具塞刻度试管：50mL；移液：2~20μL、5~50μL、20~200μL、100~1000μL.
3 仪皿
高效液相色谱仪：配有紫外检测皿/ 二极管阵列检验皿；分析天平：感量0.0001g 称0.01g；pH 试纸：pH 0.5~5.0；溶剂过滤皿；离心机；涡旋混合皿；超声波清洗皿.
4 测定步骤
4.1 试样的制备
称取混合均匀的15g 乳制品样品（准确至0.01g）,置于50mL 具塞刻度试管中,加入5mL 乙酸铅溶液,在加入25mL 甲醇/ 水（1:1）,涡旋混匀,加水至50mL,涡旋振荡6min,离心10min,转速为3000r,静置后用一次性注射皿吸取上清液,用针式过滤皿过滤,作为分析试样.
4.2 高效液相色谱测定
4.2.1 色谱条件：
色谱性：TechMate CR（1:5）-ST 5μm 120? 4.6×250mm；流动相：磷酸盐缓冲溶液—乙腈（70+30,体积比）；流速：1mL/min；柱温：35℃；检测波长：240nm；进样量：20μL.
4.2.2 液相色谱分析测定
4.2.2.1 仪皿的准备
开机,用流动相平衡色谱柱,待基线稳定后,进样检测.
4.2.2.2 定性分析
依据保留时间一致性进行定性识别,根据三聚氰胺标准物质的保留时间,确定样品中三聚氰胺的色谱峰.
4.2.2.3 定量分析：校准方法为外标法.
4.2.2.3.1 标准曲线的绘制
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